日常水質(zhì)檢測時紅霉素和青霉素的測定方法

。準(zhǔn)確稱取10.0mg青霉素標(biāo)準(zhǔn)品，用50%乙腈溶液溶解并稀釋成濃度為100ug/mL的標(biāo)準(zhǔn)貯備液；也可直接購買有證標(biāo)準(zhǔn)溶液，在-10℃以下冷凍、避光保存；或參照制造商的產(chǎn)品說明保存，使用時應(yīng)恢復(fù)至室溫并搖勻。
9.紅霉素和青霉素混合標(biāo)準(zhǔn)使用液:濃度為10.0ug/mL。分別取紅霉素和青霉素標(biāo)準(zhǔn)儲備液各1.00mL于10.0mL容量瓶中，用50%乙腈溶液定容，可得到紅霉素和青霉素混合標(biāo)準(zhǔn)使用液。
10.濾膜：一次性針頭式過濾器，0.22um,混合纖維素酯（MCE）材質(zhì)。
11.一次性聚丙烯針管。

檢測所用儀器

1.液相色譜-三重四級桿質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源（ESI）,具備梯度洗脫和多反應(yīng)監(jiān)測功能。
2.分析天平：感量為0.0001g。
3.樣品瓶：100mL磨口或帶聚四氟乙烯內(nèi)襯墊瓶蓋的棕色玻璃瓶。
4.微量注射器或移液器：10ul、50ul、100ul、500ul、1.0mL。

水樣的采集和制備

  我們可以按照相關(guān)規(guī)定進(jìn)行水質(zhì)樣品的釆集。水樣釆集時應(yīng)充滿樣品瓶，不留空隙。在4℃以下冷藏、避光保存。2d內(nèi)完成分析。

水樣的制備

  水樣需充分混勻，取約10mL樣品經(jīng)0.22um濾膜過濾，棄去至少1mL初濾液后，準(zhǔn)確移取500uL過濾后的樣品于棕色進(jìn)樣瓶中，再加入500uL乙腈，混勻后待測。

空白水樣的制備

  用實驗室一級純水代替水樣，然后按照水樣的制備步驟對空白水樣進(jìn)行操作。

檢測步驟

液相色譜條件

  色譜柱為C18（100mmX2.1mm,粒徑1.7um），或相當(dāng)者；流動相為A：乙腈，B：0.1%甲酸水溶液；流速為0.25mL/min；柱溫為30°℃；進(jìn)樣體積為10uL；流動相梯度洗脫程序可以參考相應(yīng)圖表。

質(zhì)譜條件

  離子源為電噴霧離子源（ESI）;掃描方式為正離子模式；監(jiān)測方式為多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）；去溶劑氣、錐孔氣、碰撞氣均為高純氮氣或其他合適氣體；

標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

  移取適量的紅霉素和青霉素混合標(biāo)準(zhǔn)使用液，用50%乙腈溶液稀釋，配制至少5個濃度點的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，標(biāo)準(zhǔn)溶液中紅霉素和青霉素的參考濃度質(zhì)量濃度分別為0.100ug/L、0.200ug/L、0.500ug/L、1.00ug/L、2.00ug/L、5.00ug/L